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更新時間：2025-11-27
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Shoji Takeuchi 團隊與 POLA 化學工業合作，在生物制造領域期刊《Biofabrication》（2024 年第 16 卷）發表研究 —— 開發出一款帶可灌注微通道的培養插入裝置，不僅能在常規 6 孔板中構建體外全層皮膚模型，還能直接完成屏障功能評估，無需轉移模型或額外輔助工具，為化妝品、藥物皮膚測試提供了更高效、貼近生理的解決方案。
隨著全球 40 多個國家禁止或限制化妝品動物實驗，3D 體外皮膚模型成為研究的重點。但傳統模型存在短板：要么是靜態培養缺乏營養流動，無法模擬體內血管循環；要么是功能評估時需轉移模型，易損傷皮膚結構，還難以區分 “經皮滲透" 和 “血管吸收" 這兩個指標 —— 而后者直接影響藥物全身暴露風險的評估準確性。
為解決這些問題，研究團隊聚焦 “仿生設計 + 便捷測試"，打造了集成可灌注微通道的培養裝置，同時結合皮膚屏障評估的方法（跨上皮電阻 TEER測量、經皮水分流失 TEWL檢測），讓體外模型更貼近體內皮膚的結構與功能。
適配性強：直接放入常規 6 孔板，無需專用培養設備，降低實驗門檻；
錨定設計：中心的反向法蘭形錨定結構，讓膠原蛋白基質（真皮成分）收縮到預設尺寸，避免漏液，同時確保表皮完整覆蓋真皮；
微通道功能：內置 4 條血管樣微通道（可擴展至 7 條），通過灌注模擬體內血液流動，還能單獨評估血管吸收效率。
1. 真皮制備：混合人真皮成纖維細胞與 I 型膠原蛋白，注入裝置后培養 7 天，形成帶微通道的真皮；
2. 表皮接種：在真皮表面接種人表皮角質形成細胞，培養 5 天形成表皮 - 真皮連接；
3. 血管內皮化：在微通道內接種人臍靜脈內皮細胞（HUVECs），模擬血管結構；
4. 氣液界面培養：靜態或灌注條件下培養 7 天，誘導表皮角質化，形成功能完整的全層皮膚模型。
屏障功能評估：① 跨上皮電阻（TEER）：用ASCH AS-TZ1經皮電阻測試儀直接在裝置內測量，反映表皮完整性；
ASCH AS-TZ1經皮電阻測試儀
② 經皮水分流失（TEWL）：使用ASCH VAPOSCAN經皮水分流失測量儀，量化皮膚水分散失，輔助驗證屏障功能；
ASCH VAPOSCAN經皮水分流失測量儀
③滲透測試：通過 HPLC-UV 檢測，區分經皮滲透和血管吸收量。
灌注培養的 HSE 表皮厚度達 80-100μm，是靜態培養（30-50μm）的 2 倍，且基底角質細胞更極化，表皮分化層次更清晰；免疫熒光顯示，灌注組的膠原蛋白 IV（基底膜關鍵成分）表達高于靜態組，與商用皮膚模型相當。
TEER 測試顯示，灌注組的屏障完整性幾乎是靜態組的 5 倍；滲透測試中，灌注組 45 分鐘后經皮滲透量低于靜態組，證實其屏障功能更強，且能清晰區分 “經皮滲透" 和 “血管吸收"—— 加入 VEGF（血管內皮生長因子）后，血管吸收量增加，說明模型可模擬血管通透性變化。
裝置設計讓TEER測量、滲透測試直接在培養容器內完成，避免了模型轉移導致的結構損傷，數據重復性更高，同時簡化了實驗流程。
這款裝置解決了傳統體外皮膚模型 “培養與測試脫節"“缺乏血管循環模擬" 的問題，不僅能用于化妝品安全性、滲透性評估，還能模擬藥物的經皮吸收與全身暴露風險，為皮膚相關基礎研究、藥物研發提供了更貼近生理的模型工具。
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